Grace’s昆虫干粉培养基

描述

Dulbecco’s 干粉培养基

Grace’s昆虫培养基是由Grace改良的Wyatt培养基，该培养基与昆虫血淋巴的化学成分更为相近，Grace使用这种培养基成功建立了第一个昆虫连续细胞系。Grace’s昆虫培养基最初用于澳大利亚白星橙天蚕蛾 (Antherea eucalypti) 细胞的培养，适当补充添加剂后， Grace’s 补充昆虫培养基广泛用于草地贪夜蛾细胞 Sf9 和 Sf21 的生长。Sf9 和 Sf21 细胞通常用于借助杆状病毒表达载体系统 (BEVS) 来表达重组蛋白。Grace’s未补充昆虫培养基可用于昆虫细胞转染或蛋白标记研究（含蛋氨酸）。在用作生长培养基之前，Grace’s未补充昆虫培养基需要补充 10% 胎牛血清 (FBS)、3.33 g/L 乳清蛋白水解物和 3.33 g/L 酵母粉。Grace’s昆虫培养基需要5%-10% CO2 来维持生理 pH 值。

针对广泛的细胞培养应用，我们提供了多种组分的Grace’s昆虫改良培养基，以及可定制成分的Grace’s昆虫培养基。

此款Grace’s干粉细胞培养基在配制时需要补充碳酸氢钠、调节 pH 并过滤。详细配制方案如下：

1. 向尽可能接近最终体积的混合容器中加入 950 mL 蒸馏水。
2. 将干粉培养基加入室温（15°C 至 30°C）水中并轻轻搅拌。请勿将水加热。
3. 冲洗包装内侧，以清除所有残留粉末。
4. 向培养基中加入50mL的75g/L NaHCO3溶液。
5. 通过缓慢加入并搅拌 1 N NaOH 或1 N HCl，将 pH 值调节到所需最终工作 pH 以下0.2到0.3个单位。过滤后 pH 值可能升高0.1至0.3个单位。建议的工作pH值为7.0-7.4。
6. 使用蒸馏水调节最终体积。
7. 立即使用正压过滤系统，通过 0.2 μm 过滤膜将培养基处理到无菌容器中。