M199 干粉培养基 细胞培养基

Description

M199 干粉培养基

M199全称Medium 199，即培养基199，是Morgan等在1950年设计的，最初用于鸡胚成纤维细胞的营养研究，现已广泛应用于各种动物细胞的培养，包括一些非哺乳类动物细胞。M199特别适用于非转化细胞的培养，也常用于病毒学、疫苗生产，以及大鼠胰腺上皮细胞和小鼠晶状体组织的原代外植体的体外培养。与其他基础培养基相比，M199含有独特的成分，包括腺嘌呤、腺苷、次黄嘌呤、胸腺嘧啶、以及其他的维生素。M199有两种平衡盐成分，Earle’s盐成分常用于CO2环境，Hank’s盐成分用于非CO2的环境。199 培养基不含蛋白、脂质或生长因子。199 培养基使用碳酸氢钠缓冲系统 (2.2 g/L)，因此需要 5–10% CO2 环境来维持生理 pH 值。
针对广泛的细胞培养应用，我们提供了多种组分的M199改良培养基，以及可定制成分的M199培养基。

此款M199干粉细胞培养基在配制时需要补充碳酸氢钠、调节pH值并过滤。详细配制方案如

1. 向尽可能接近最终体积的混合容器中加入 950 mL 蒸馏水。
2. 将干粉培养基加入室温（15°C 至 30°C）水中并轻轻搅拌。请勿将水加热。
3. 冲洗包装内侧，以清除所有残留粉末。
4. 向培养基中加入32mL的75g/L NaHCO3溶液。
5. 通过缓慢加入并搅拌 1 N NaOH 或1 N HCl，将 pH 值调节到所需最终工作 pH 以下0.2到0.3个单位。过滤后 pH 值可能升高0.1至0.3个单位。建议的工作pH值为7.0-7.4。
6. 使用蒸馏水调节最终体积。
7. 立即使用正压过滤系统，通过 0.2 μm 过滤膜将培养基处理到无菌容器中。