Description
核酸提取或纯化试剂的用途
用于核酸的提取、富集、纯化等步骤。其处理后的产物用于临床体外检测使用。
核酸提取纯化试剂的使用方法:
一、使用核酸提取试剂前
将蛋白酶k溶剂移入含有蛋白酶k冻干粉中,混匀。
- 在CY-F006-10(50preps-细胞)和CY-F006-20(50preps-唾液)的CY3、CY4中分别加入18ml、42ml无水乙醇,混匀。
- 在CY-F006-11(100preps-细胞)和CY-F006-21(100preps-唾液)的CY3、CY4中分别加入36ml、84ml无水乙醇,混匀。
二、拭子提取步骤:
- 拭子干采加入0.6ml的CY1液体和10ul蛋白酶进行混合,放置于65℃空气培养箱培养30分钟(或湿采:装有拭子加保存液的样本离心管在12000rpm条件下离心1分钟,保留沉淀,去除上清液。加0.6mlCY1液体,10ul蛋白酶k,混匀,放置于65摄氏度空气培养箱培养30分钟)
- 去掉拭子,12000rpm离心1分钟
- 取出全部上清到新的离心管,进行实验
- 加入0.25mlCY2液体和10ul磁珠(使用前摇匀),混匀12min,放置在磁力架上静置30s,吸掉液体
- 加入0.6mlCY3液体,混匀3分钟,放置在磁力架上静置30s,吸掉液体
- 加入0.6mlCY4液体,混匀3分钟,放置在磁力架上静置30s,吸掉液体
- 重复步骤2~6
- 室温干燥10-20分钟,加50ulCY5液体洗脱,混匀,放置在磁力架上静置30s,转移液体到新的离心管
- 测OD
三.唾液提取步骤
- 唾液加保存混合液12000rpm离心1分钟
- 保留沉淀,去除上清液
- 往里面加入0.6mlCY1液体和10ul蛋白酶k,混匀,放置于65摄氏度空气培养箱培养30分钟。
- 12000rpm离心1分钟,取出全部上清到新的离心管,加10ul磁珠和0.25mlCY2,混匀12分钟,放置在磁力架上静置30s,吸掉液体。
- 加入0.6mlCY3液体,混匀3分钟,放置在磁力架上静置30s,吸掉液体。
- 加入0.6mlCY4液体,混匀3分钟,放置在磁力架上静置30s,吸掉液体。
- 重复⑥步骤
- 室温干燥10~20分钟,加50ulCY5液体洗脱,混匀,放置在磁力架上静置30s,转移液体到新的离心管。
- 测OD
注:如需除RNA,可自行配制RNaseA10mg/ml:溶剂(10mM乙酸钠:pH5.0),煮沸15min用Tris-Hcl调pH7.5,-20摄氏度保存。
核酸提取或纯化试剂的产品性能指标:
- 核酸提取试剂为无色透明液体(磁珠为黑色液体),不得有污染、漏液现象。
- 每支提取试剂的容量为0.8ml/1.1ml/6ml/12ml/18ml/24ml/36/48ml/72ml。
- CY1和CY5的pH应为8.0
- OD260/OD280比值应为1.6-1.9
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