核酸提取试剂 核酸纯化试剂

描述

核酸提取或纯化试剂的用途

用于核酸的提取、富集、纯化等步骤。其处理后的产物用于临床体外检测使用。

核酸提取纯化试剂的使用方法：

一、使用核酸提取试剂前

将蛋白酶k溶剂移入含有蛋白酶k冻干粉中，混匀。

1. 在CY-F006-10(50preps-细胞)和CY-F006-20(50preps-唾液)的CY3、CY4中分别加入18ml、42ml无水乙醇，混匀。
2. 在CY-F006-11(100preps-细胞)和CY-F006-21(100preps-唾液)的CY3、CY4中分别加入36ml、84ml无水乙醇，混匀。

二、拭子提取步骤：

1. 拭子干采加入0.6ml的CY1液体和10ul蛋白酶进行混合，放置于65℃空气培养箱培养30分钟（或湿采：装有拭子加保存液的样本离心管在12000rpm条件下离心1分钟，保留沉淀，去除上清液。加0.6mlCY1液体，10ul蛋白酶k，混匀，放置于65摄氏度空气培养箱培养30分钟）
2. 去掉拭子，12000rpm离心1分钟
3. 取出全部上清到新的离心管，进行实验
4. 加入0.25mlCY2液体和10ul磁珠（使用前摇匀），混匀12min，放置在磁力架上静置30s，吸掉液体
5. 加入0.6mlCY3液体，混匀3分钟，放置在磁力架上静置30s，吸掉液体
6. 加入0.6mlCY4液体，混匀3分钟，放置在磁力架上静置30s，吸掉液体
7. 重复步骤2~6
8. 室温干燥10-20分钟，加50ulCY5液体洗脱，混匀，放置在磁力架上静置30s，转移液体到新的离心管
9. 测OD

三.唾液提取步骤

1. 唾液加保存混合液12000rpm离心1分钟
2. 保留沉淀，去除上清液
3. 往里面加入0.6mlCY1液体和10ul蛋白酶k，混匀，放置于65摄氏度空气培养箱培养30分钟。
4. 12000rpm离心1分钟，取出全部上清到新的离心管，加10ul磁珠和0.25mlCY2，混匀12分钟，放置在磁力架上静置30s，吸掉液体。
5. 加入0.6mlCY3液体，混匀3分钟，放置在磁力架上静置30s，吸掉液体。
6. 加入0.6mlCY4液体，混匀3分钟，放置在磁力架上静置30s，吸掉液体。
7. 重复⑥步骤
8. 室温干燥10~20分钟，加50ulCY5液体洗脱，混匀，放置在磁力架上静置30s，转移液体到新的离心管。
9. 测OD

注：如需除RNA，可自行配制RNaseA10mg/ml：溶剂（10mM乙酸钠：pH5.0），煮沸15min用Tris-Hcl调pH7.5，-20摄氏度保存。

核酸提取或纯化试剂的产品性能指标：

• 核酸提取试剂为无色透明液体（磁珠为黑色液体），不得有污染、漏液现象。
• 每支提取试剂的容量为0.8ml/1.1ml/6ml/12ml/18ml/24ml/36/48ml/72ml。
• CY1和CY5的pH应为8.0
• OD260/OD280比值应为1.6-1.9